Comu si securizeghja una Cultura Bacterial (Lysophilization)

A liofilisazione o securizazione, hè un prucessu curtitariu di laburatoriu

A securizazione chì hè chjamata lyophilization o cryodesiccation hè u prucessu di sguassà l'acqua da un pruduttu chì hè stata cungiata (è poi sottu sottu à un vacuum) chì permette a ghiacciata di cambià da un solidu à un vapore, senza passà una fase di uquid. Ice (o altri solventi congelate) sò sbulicati da un pruduttu per u prucessu di sublimazione è i molécule d'acqua chì sò sappiutu sottu à u prucessu di a desurizzioni.

I Basi di Liofilisazione

Unu di e migliori modi per salute un fugliu fungatu, di levitu o di una altra cultura di microorganisimu per longi periudi di u tempu hè di utilizà u prucessu di securizazione. Questu prucessu laburatoriu di laburatoriu pò esse realizatu cù qualsiasi cunzatura di securizazione chì si mantene a vostra cultura. Pirchì la liofilisazione hè a forma più assicurata è cumplicata di u siccatu, u prucessu hè spessu restrittu à i sustanzi delicati è sensitivi à u sensu di valuriziu. I sustanzi chì ùn anu micca danatu da a glasura pò esse stati in liofilamentu di manera chì l'almacenamiento refrigeratu ùn hè micca necessariu.

Stu prucessu pò piglià pocu ch'è e trè ore, è finu à 24 ore, senza chì u tempu di creazione di cultura.

U prucessu di Passiu di Liofilisazione

1. Prima, crescenu una cultura oghje, o cimentu, di u microorganismu in LB o à l'altri pratiche d'agar nutrijenti appropritatu.

2. Avanzate, preparate preziosi sterili di crimp-cap per autoclavement prima di u tempu, cù i tappetti (tapputi di gomma) sottumessu nantu à a cima. Pujianu stampate stampate stampate cù l'identità di a cultura in l'internu di i tubi prima di autoclau. Oltre, utilizate tubi cù capelli di sterile .

1. Aghjunghjite 4 mL buffu di liofilamentu à u pianu. Se necessariu, i celluli ponu esse suspesi cù un vernice sterile di vetru.

2. Trasmissione rapidamente a suspensión cultura à i vial esterilizati. Aggiunate circa 1,5 mL per vial. Cunfanzu cù u capu di gomma.

3. Freeze la suspensione di a cultura à l'internu di i vessi, incunzendu i viale in a -20 graus Celsius freezer.

1. Quandu i culturi sò sbuchjulati, preparanu a lattice securizeghja per turnà è permette u tempu per a cundizioni persa è vacanti per stabiliscia. Fate cusì cun l'urdinamentu di u fabricatore per a marca particulare di securizazione chì segui.

2. Cusì, è asèpticu, fate i tappeti vialmentamente in cima di i fasci, per quandu l'umidità pò scapparà durante u prucessu di securizazione, è poverà i viale in una camera di securizazione. Apply the vacuum to the chamber according to the instructions of the manufacturer.

3. Puderà u tempu di a cultura per liofilize (sece). Questu pò piglià da un pocu d'oghje à ghjornu oghje secondu u voluminu di ogni mostra è quanti dispusizione chjamate.

4. Eliminate i samples da a camera di securizazione securizazione cù l'indicazione di u fabricatore è seguitanu immediatamente i viale cù i tappetti di gomma, da quì u pinnate.

5. Amparate a cultura di liofilizada in a temperatura di l'ambienti.

U vostru necessariu

• Freeze-dryer
• Nutriente o àutri pratiche addivati ​​d'agar (è incubator à cultivà cultura)
• Vessi vetru
• Buffer di liofilisazione
• I frasi di Crimp-top con tappetti di gomma (è un crimper per appricà i tappi)
• Freezer

<sub>Reference:

SP Scientific. Principi basi di Cunnessione secante. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>