Quessi bufferi pò esse usatu per l'applicazioni biològichi à u pH neutru vicinu
I trè valori pKa di l'acidus phosphoric (da u Manual di a CPR di Fimici è Fìsica) sò 2.16, 7.21 e 12.32. U fosfate di monosodià è a so basa di cunghjettu, u fosfat disodiu sò generalmente utilizati per generà buffers di valuri di pH à 7, per applijenzi biològichi, com'è quì sottu.
Hà fattu stu buffu hè un pocu più forte di fà u buffuni TAE è TBE. Ùn hè micca assai difficiu, in ogni modu. Simply average. Ci vò à piglià circa 10 minuti per fricà stu buffu. Eccu cumu.
1. Decide in a pruprietariu di u buffu
Prima di fà un buffer, pudete avà primu cunnosce chì molarizza voli à esse, quantu u voluminu per fà è ciò chì hè u pH desitvutu. A maiò parte di u bufferu u travagliu megliu in a cuncintrazioni trà 0.1 M à 10 M. U pH deve esse à 1 unità di pH da a basa di l'acid / conjugato pKa. Per simplicità, stu càlculu di mostra serà per 1 litru di buffer.
2. Determina a Ratio d'Acid à Base
Aduprate l'equazzioni Henderson-Hasselbalch (sottu) per stabilisce quale hè a ratio di l'acidu à a basa hè necessaria per fà un buffer di u pH desitxutu. Aduprà u valore pKa più vicinu à u pH desitxutu è a rapportu serà riferite à u paru di acidezza base cunghjunta chì currisponde à quì pKa.
HH Equation: pH = pKa + log ([Base] / [Acid])
Per un buffer di pH 6.9, [Base] / [Acid] = 0.4898
Sustituitu per [Acid] è risolviu per [Base]
A molariarità scelta di u buffu hè a summa di [Acid] + [Base].
Per un buffer 1 M, [Base] + [Acid] = 1 è [Base] = 1 - [Acid]
Per sustituisce questu in a ràtula equation, da u passu 2, puderete:
[Acid] = 0.6712 mol / L
Solu per [Acid]
Utilizà l'equazzioni: [Base] = 1 - [Acid], pudete calculate chì:
[Base] = 0.3288 moles / L
3. Agħmel l-Aċidu u Konjugat Base
Dopu chì avete usatu l'equazioni Henderson-Hasselbalch per u calculà a ratio di u acidu à a basa hè necessaria per u vostru buffu, preparanu pocu sottu 1 litru di suluzione usendu l'ammonti curati di fosfatato di monosodju è di fosfat disodiu.
4. Verificate u pH
Aduprà una sonda di pH per verificà chì u pH correctu per u buffu sò righjittati. Ajuste un pocu quantu necessariu, usendu l'acidu fosfòlicu o l'idrossidu di sodiu (NaOH).
5. Correct the Volume
Quandu u pH desitvutu hè ghjustu, portanu u volumu di buffer à 1 litru. Allora dilute u buffer as desired. U listessu buffer pò esse diluted to create buffers of 0.5 M, 0.1 M, 0.05 M à tuttu.
6. Tips per u buffer
Ricurdativi chì pKa ùn hè micca misurata per un valore exactu. Valorii pocu diffirenti puderanu esse dispunibule in a literatura da diverse fonti.
7. Ci hè chì hè bisognu
Per fà u buffu, avarete bisognu di trè sustanzi, mentre chì i minerali sò materiale. I sustanzi chì sò fosfate monosodju, fosfate disodiu, à l'acidu fosfòlicu o à l'idrossidu di sodium per u pH.
Hè ancu bisognu di un metru di pH è di sonda è labware appruvati. Questu includenu un torcu volumètricu, cilindri graduate, beakers e stir bars.
Finalmente, avete bisognu di un puzzicheghju spirituu.