Cumu fà sta Buzzuraghju Li Manta Immunohistoquimica
A salina tamponada di fosfatatu (PBS) hè una solu buffer chì hè comunale utilizatu per l'immunohistoquimica (IHC) tinzioni è hè spissu usata in a ricerca biològica. PBS hè una solu di sal di salinata in acqua chì cuntene l'idrogenfosfatariu sodium, di sodium chloride è, in certi casi, di cloruri di potassiu è di fosfat di dihydrogen di potassium.
Immunohistochemical Staining
Immunohistochemistry si riferisce à u prucessu di attruvamentu d'antigens, cum'è e prutezione in i celluli di una parti di tissutu, aduprendu u principiu di l'antichi in l'unificazioni specifiche à l'antigeni in tessuti biològichi.
U mannamentu immunofluorescente era u primu mètudu di u manufonu immunohistochemicu.
Antigens si videnu visibili cumu cunjugatu cù anticorgii chì utilizanu tinturi di fluoriscenza per una rettitudine d'attacheti di antigen-anticorpu. Questu proghjettu vene quandu hè attivatu da una luminaria excitativa di una lonxitude d'onda specifica sottu un microscopu fluoriscente.
L'osmolutezza è i cuncintrazioni ioni di e suluzioni sò questi di u corpu umanu, sò isotònici.
A Receta per PBS
Pudete preparà PBS in parechje manere. Ci sò parechje formule. Uni di elli ùn cuntene potassu, mentri àutri cuntenenu calcium o magnesiu .
Questa ricetta hè relativamente piacevule. Ghjè per 10X soluzione di stima PBS (0.1M). In ogni modu, pudete puru fà una suluzione di 1X, o cumincià cù a ricetta 10X è diluce à 1X.
U prucessu tutale dura di 10 minuti.
Una opción per aghjustà Tween hè ancu dinò.
Chì Avete bisognu à fà PBS Buffer
- Sodium phosphate monobasic (anhydrous)
- Fibra di sodiu dibasic (anhydrous)
- Sodium chloride
- Scale è pesanu barche
- Stirrer magneticu u ħawwad bar
- Un sonda di pH chì hè calibratu è e solu solu per l'aghjurnamentu di u pH
- Bulettu 1L
- Tween 20 (optional)
Cumu faciule Fosfatatu U Saline Buffered (PBS)
Pesa 10.9 g di fosfatatu di sodiu anhydrous (Na2HPO4), 3,2 g fosfatato di sodiu anhydrous monobasic (NaH2PO4), è 90g di sodium chloride (NaCl).
Disolvi in pocu in 1L acqua distillata.
Ajuste u pH à 7,4 è fà a suluzione finu à un voluminu finali di 1L.
Dilute 10X prima di l'usu è riparate u pH se ne necessariu.
Pudete fà una soluzione PBS chì cuntene 0.5% entre Tween 20 aghjustendu 5mL Tween 20 à a solu 1L.
Tips per fà PBS Buffer
Amparate a buffer à a temperatura di l'ambienti dopu chì avete fattu a suluzione PBS.
Ùn sò sustitutu i reagents non-anhydrous, ma duverebbenu recalculate a massa adatta di ognuna per aiutà e molécula di l'acqua aghjunata.
Usi di fosfate Buffered Saline (PBS)
U salinu buffered fosfatatu hè parechje usi perchè hè isotunicu è micca tòxicu per a maiò parte di e cilesti. Pò esse adupratu per diluisce i sustanzi è hè spessu usatu per lavorà i cuntenuti di e celu. PBS pò esse usatu cum'è dilutent in varii metudi di securità di biomoleculi perchè e molécule d'acqua in questu hè struitu in u sustegnu di a proteina, per esempiu. Serà "seccu" è immobilizzati à una superficia solidosa.
U pH si ferma è uniforme per impedisce a distruzioni di i celi.
A filetta fina di l'acqua chì attacca à a sustanza ùn impedisce a desnaturalizazione o altre cunfurmazioni. U buffer di carbonate pò esse usatu per u listessu propiu, ma cun menu efficacità.
PBS pò ancu esse usatu per piglià un spettru di rifarenza à u misurazione di l'assulutazione di a proteina in ellipitmetta.