Questu Uperficante Hè Solu Appruvatu per studià u Muvimentu di DNA
Questu buffu hè un forte forza iònica è una capacità buffetta baixa. Hè megliu adattatu à l'elittrophoresi di e grande (> 20 kb) pezzi di DNA è deve esse rimpiazzatu frecuentemente o rinfruciati per più longu (> 4 h) timesi di gel.
In questu in mente, pudete vulerete tandu parechji lotte di u buffu.
Assicuratevi chì u buffu hè facilissimu fattu di fà è i passi pò esse realizatu rapidamente, chì facenu più d'un lotu in un tempu ùn deve micca particularmente cunsumante o difficult to pull off. Utilizà l'urdinamentu sottu, deve solu solu 30 minuti per fà u buffu TAE. Eccu cumu:
Preparate una Successione Stituzione di EDTA
Un solu edta (etilenediamine tetraacetic acid) hè preparatu davanti à u tempu. L'EDTA ùn viaghja micca solu in una solu finu à chì u pH hè agitu à circa 8,0. Per una solu suluzione di 500 millilitru di 0,5 EDTA EDTA, pesa 93,05 grammi di sal di discondu EDTA (FW = 372,2). Disolvi in 400 millilitri acqua deionizzata è agisce u pH cù l'idrossidu di sodiu (NaOH). Arricà a suluzione per un voluminu finali di 500 millilitru.
Cumpresti una Solució di UTA di u TAE
Fate una settimana di cuncentrazione (50 latta) di u prugramma cù 242 grammi di basa Tris (FW = 121,14) è dissolvi in circa 750 millilitru di acqua diionizzata.
Impruddientemente, aghjunghjendu 57.1 millilitru di l'acidu glacial è 100 millilitru di 0,5 EDTA M (pH 8,0). Dopu quì, aghjusta a suluzione per un voluminu finali di 1 litru. Questa solu risolse pò esse guardatu à a temperatura di l'ambienti. U pH di stu cuscusu ùn hè agitu è avarà da circa 8.5.
Preparate una Solució di u travagliu di u TAE
A solu suluzione di 1e buffe TAE hè fatta da solu diluzione a suluzione di stock 50x in acqua diionizzata.
A cuncentrazione di solute finali sò 40 mM. Tris-acetate è 1 mM EDTA. U bufferu hè prestu à utilizà à a correru un gelettu agarose.
Ciò chì ci hè bisognu di u buffer
Perchè chì u buffu TAE hè solu bisognu di un esempiu rapidu è simplice di struzzioni, a quantità di materiale necessariu per questu ùn hè micca eccessivu. Hè bisognu di salute di discu, u basa di Tris, è l'acidu glacial acetic.
Hè fattu u buffu ancu esiste un metru di pH è i normande di calibrazzione, comu appruvati. Avete bisognu ancu 600 millilitru è 1500 millilitri chiatte o fiaschi cum'è cilindri graduati. Finalmente, avete bisognu di acqua desionizata, rimburscia e stir.
Wrapping Up
Induva voli induve fà u buffu - in un situ di scola, un locu di u travagliu o un altru locu, cum'è a vostra casa? Verificate l'inventariu prima di cumincià per assicurà chì avete tutte e le materiale per u buffu di u TAE.
Se preferite micca avè da pagà per i materiali, sceglie per fà u buffu fora di a vostra casa hè cunsigliu. Pudete facilmente facilità aduprà e materii chì avete bisognu o visitate una spicialità per elli.