Cumu queste ponu esistenu
Quantu avete sapè di l'enzimi di restrizzioni? Assicuratevi capiscitura di ciò chì facenu è per chì anu impurtante, cù sta scusa.
Definizione Restriction Enzymes
I endonucleasea di restriction sò una classa di enzyme chì cut molecule di DNA. Ogni enzimi ricunnosce una seqüència unica di nucleotidi in u filatu di DNA. Siculi secuenzi sò in generale 4 o 6 paraglie postu longu. I sequenzi sò palindromici in chì a fila di DNA di complementu hè a listessa secunna solu in a direzione inversa.
In autri vocabuli, i dui ligami di DNA sò cutatu in u stessu locu.
Oghje L'induve Ci sò Enzymes
Enzimi di restrizzione si trovani in parechje sfarenti varii di bacteria induve u so rolu biologicu hè di participà à a difesa celular. Sti l'enzymes "restringenu" l'attese straneri (per esempiu virali) chì entra in a cellula, distruggiennu. A célula albergante hà un sistema di modificazione di restrizzioni chì methylates a propiu ADN in siti specifiche per i so enzimi di restrizzioni rispettivi, cusì a prutezzione di a crostazione. Hè scuperta più di 800 enzimi cunnisciutu chì ricanuscianu più di 100 seconde nucleuside differenti.
Utilizazione in Biotechnologia
Enzimi di restriction sò usati in biotecnologie per cut DNA in branchi cchiu picchi à scopu di studià i difetti di lonxitude di fragenze trà l'individui (Fragmenta di Riticimentu Staghje Polimorfisimu - RFLP). Anu ancu utilizati per a clonazzioni di i geni.
I tecnulugichi RFLP sò stati utilizati per stabilisce chì individueli o gruppi di particularità sò differenzi distinti in secuenze genetichi è scrittura di restrizzioni in certi esposti di u genomu.
I cunniscenu di issi spazii unichi hè a basa per l'impresa d'DNA . Ogni di sti metudi dipende nantu à l'usu di l' electroforesi gel à agarose per a siparazioni di i fragmenti di DNA. U buffu TBE, chì hè fatta di Tris base, l'acidu boricu è EDTA, hè comunmente utilizatu per l'electroforesi gel à agarose per esaminà i produtti d'DNA.
Tipi di Enzimi di Restriction
Ci hè trè tippi differenti perti di enzimi di restrizzioni. U tipu Cuts DNA à l'altezzii aleatorii finu à 1000 o più parenti in u situ di ricunniscenza. Tipu III cutsa à circa 25 paraglie di u situ. I Tipi I è III necessitanu d'ATP è pò esse grandi enziemi cù multiple unità. L'enzimi di Type II, chì sò principarmenti usati in biotecnologica, cut DNA in a secùntu ricunnisciute senza a necessità di ATP è sò più chjesi è simplici.
L'enzimi di restrizzioni di tipu II sò numiuli chjamati per l'animali bacterial da quale sò isolati. Per esempiu, l'enzyme EcoRI hè statu isolatu da E. coli . A maiò parte di u publicu hè familiarizatu cù e culis di E. coli in l'alimentariu.
L'enzimi di restrizzioni di tipu II pò generà dui tipi di tagliu, secondu a chjave si chjappà tanthe ramu à u centru di a secùncia di ricunniscenza o di ogni fila vicinu à una fini di a secùa di ricunniscenza.
L'anzianu cortu duverà "alcune affullante" senza nudda nucleòtida in sopra. L'ultima genera "sticky" o "cohesive" finisce per chì ogni frunze resultante di l'ADN hà una sopra chì cumplimenti i other fragments. I timidi sò utili in genetica moleculare per fà DNA e recombinante .
Questa forma di DNA hè distinchendu perchè hè stata produtata da a ligata (alluntanatu) di duie o più funti diffirenti chì ùn sò micca urigginati in lea.